伤口愈合与迁移实验的应用

　　细胞迁移是许多重要生理过程的核心机制。例如，胚胎发育、组织损伤修复以及伤口愈合均依赖于可控的细胞迁移。相反，在癌症转移、炎症等病理状态下，细胞迁移则呈现失调状态。因此，研究细胞迁移的机制具有广泛的科学意义。

使用预装2孔插件的µ-Dish_{35 mm, high} 培养皿（货号81176）培养的内皮细胞。

图片来源：美国宾夕法尼亚大学医学院Derek Sung

　　伤口愈合实验和迁移实验是研究不同条件下细胞迁移行为的经典方法，其应用涵盖以下关键科学问题：

　　• 条件性迁移与伤口愈合研究

　　细胞在特定条件下的迁移行为如何变化？例如：

　　药物/增强剂/抑制剂处理后的响应

　　基因沉默（siRNA或CRISPR/Cas9技术）的影响

　　基质硬度或成分改变时的适应性

　　• 高通量药物筛选

　　特定药物如何影响目标细胞（如癌细胞）的迁移速率？

　　• 细胞互作研究

　　迁移过程中细胞间是否保持接触？

　　细胞间如何协同或竞争？

　　细胞的自主迁移能力如何量化？

　　• 2D侵袭实验

　　两种细胞类型（如肿瘤细胞与成纤维细胞）的相互作用机制是什么？

2D侵袭实验中的两种不同细胞类型。数据由德国莱比锡大学C. Matern和K. D. Nnetu提供

　　注：与普通迁移实验不同，定向迁移实验（如趋化实验）通过构建梯度环境（2D或3D）研究细胞的趋化性运动。

抑制剂/增强剂对伤口愈合的影响分析示例

　　如何进行伤口愈合/迁移实验：

　　此类实验的核心指标是细胞覆盖区域（间隙闭合率）随时间的变化（即划痕愈合情况），基本步骤如下：

　　1.制造细胞单层间隙：在单层细胞中形成物理性缺口。

　　2.实时监测迁移过程：通过活细胞成像技术或定时拍摄记录细胞向缺口迁移的动态。

　　3.分析间隙闭合率：手动或借助自动化软件计算闭合（划痕愈合）速率，作为核心实验结果。

　　尽管伤口愈合实验原理看似简单，但实际操作中需严格标准化以下参数以保证结果的可重复性与可靠性：

　　细胞密度均一性

　　缺口尺寸一致性

　　培养条件（温度、CO₂浓度等）稳定性

　　成像时间间隔与持续时间的精准控制

活细胞成像示例：使用 ibidi Stage Top Incubation System 台式培养箱系统实时观测MCF7细胞的伤口愈合过程（相差显微镜，10倍物镜）

　　文献：

　　J.E.N. Jonkman, et al. An introduction to the wound healing assay using live-cell microscopy. Cell Adh Migr, 2014, 10.4161/cam.36224

　　W.J. Ashby, A. Zijlstra. Established and novel methods of interrogating two-dimensional cell migration. Integr Biol 2012, 10.1039/c2ib20154b

　　ibidi Culture-Inserts划痕插件系列产品及参数：

　　订购信息：