在本应用中，我们介绍了一个简单的方案，用于在ibidi的μ-Slide 8孔腔室载玻片中培养和染色贴壁细胞。在这个例子中，我们培养大鼠成纤维细胞，用多聚甲醛固定它们，用MitoTracker染色线粒体，并用DAPI复染细胞核。也可以使用所有常用的固定技术。此外，通过一抗和二抗染色，可以通过免疫细胞化学探测其他细胞内结构。
µ-Slide 8 Well
该实验包括四个主要步骤:
在本示例中，我们使用了以下材料:
• Rat fibroblasts (cell line) 大鼠成纤维细胞（细胞株）
• μ-Slide 8 well, ibiTreat (ibidi, 80826) 八孔腔室载玻片，ibiTreat底部
• Paraformaldehyde (2% in PBS) 多聚甲醛
• Triton® X-100 (Fluka, 0.1%)
• Blocking solution (1% BSA in PBS） 封片剂
• MitoTracker Green (Life Technologies, 50 nM) 线粒体绿色荧光探针
• DAPI (Sigma, 0.1 μg/ml)
• 荧光显微镜（倒置），带有适当的滤光片组
免疫荧光实验方案对比: 传统染色方案VS ibidi染色方案
使用任何一种ibidi免疫荧光染色方案比传统方案要简便、快捷的多，无需在盖玻片上培养细胞，细胞可直接在ibidi载玻片上培养和染色。
应用实例
原肠胚是小鼠胚胎干细胞的3D聚集体，就在轴延伸之前。它们在 µ-Slide 8 孔上成像，并染色Sox2（蓝色）、Brachyury（绿色）、Tbx6（红色）和 LaminB1（灰色），突出显示了这些转录因子在神经中胚层祖细胞 (NMP) 中的空间排列和分化顺序。将原肠胚国定在BABB中，并使用Leica LIGHTNING系统在配备40倍油镜的Leica Sp8共聚焦显微镜上成像。图片来自英国爱丁堡爱丁堡大学的Matthew French。
Jurkat T淋巴细胞（上）与抗原呈递细胞（下，蓝色）形成免疫突触的共聚焦图像。丝状肌动蛋白显示为绿色。多囊泡体显示为洋红色。细胞在 µ-Slide 8 孔上成像。图片来自西班牙马德里IIBM、CSIC的Manuel Izquierdo。
MDCK细胞的荧光显微镜法。线粒体(MitoTracker，红色)，肌动蛋白细胞骨架(Phalloidin，绿色)，细胞核(DAPI，蓝色)。
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