ibidi科普小知识:您应了解的实验小常识~

date:2022-04-26 15:43:14

  1、ibidi 聚合物和玻璃盖玻片的刚度/杨氏模量是多少?
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  ibidi 聚合物盖玻片和玻璃盖玻片的杨氏模量分别约为 1 GPa 和 70 GPa。
  
  注:杨氏模量(或弹性模量)描述了固体材料的拉伸弹性。 它本质上是材料的刚度,或者换句话说,材料弯曲或拉伸的难易程度。
  
  2、是否可将ibidi Culture-Inserts/ibidi插件放置在预涂层的表面上?
 
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  一般来说,只要涂层干燥,ibidi Culture-Inserts/ibidi插件是可以放置在涂层表面上的。 请注意,插件不会粘在潮湿的表面上。
  
  有关更多信息,请关注我们公众号,参阅为什么当移除 ibidi Culture-Insert/ibidi插件时细胞有时会从盖玻片上脱落?(将在后续公众号中推出)
  
  3、ibidi 聚合物盖玻片通常会发生什么水平的气体交换/渗透性? 它们真的允许气体交换吗?
  
  ibidi 聚合物盖玻片确实允许气体交换。 在 23°C 时,O2 的渗透性为 153 cm³/ (m² d bar),CO2 的渗透性为 474 cm³/ (m² d bar)。 这意味着在 1 bar 大气压下,每天 153 cm3 O2 可以穿透 1 m2 的 180 µm (+10/-5 µm) 厚聚合物薄膜。
  
  对于 ibidi Stage Top 孵化系统的缺氧实验,我们建议使用带有玻璃底部的盖玻片 ibidi 载玻片,因为它们不透气。
  
  4、细胞可以在 µ-Slide 18 Well - Flat 中培养多长时间?
  
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  由于 µ-Slide 18 Well-Flat 的开孔结构和使用的物质量少,蒸发率高。 因此,玻片仅推荐用于不超过 48 小时的短期检测。
  
  5、是否可以在 µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔中进行独立实验?
  
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  不可以,因为 µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔之间很有可能会发生交叉污染。 但是,可以在两个主要孔中进行两个独立的实验。
  
  6、在 µ-Slide 2 Well Co-Culture 中,细胞能否穿过孔之间的屏障板?
  
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  能, 随着时间的推移,运动细胞可能会在 µ-Slide 2 孔共培养中的屏障上移动或增殖,尤其是当它们以高融合度接种时。 为避免这种情况,在载玻片表面包被可能会有所帮助。
  
  7、µ-Slide III 3in1 可以通过 ibidi 流体剪切力系统进行控制吗?
  
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  可以。 通过特殊设置,可以使用 ibidi 流体剪切力系统完全控制µ-Slide三合一通道培养载玻片。 以这种方式,可以使用层流将载玻片中的贴壁细胞暴露于交替梯度。 如需了解更多信息请联系我们获得技术支持。
  
  8、如何防止培养液蒸发?
  
  根据孵化条件,少量培养基会迅速蒸发,尤其是在长期实验期间。 此外,所有细胞培养箱都需要很长时间才能恢复湿度,尤其是在打开门之后。 虽然温度和二氧化碳在几分钟内恢复,但完全恢复湿度可能需要几个小时。
  
  由于这些问题,我们建议使用以下技术之一来最大程度地减少蒸发:
  
  将细胞培养容器放入装有湿纸巾的培养皿中。
  
  用封口膜密封培养容器。
  
  使用 ibidi 防蒸发油(例如硅油)。
  
  详细的应用说明可参见细胞共培养的全新实验方案
  
  9、我的 µ-Slides/µ-Dishes 底部有划痕。 这些是从哪里来的,我该如何预防?
 
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  ibidi 聚合物盖玻片对机械刮擦很敏感。 如果在将 ibidi µ-Slide/µ-Dish 直接放在工作台上或培养箱内时不加倍小心,它可能会受到损害。 因此,在显微镜下可能会看到小划痕。 为避免这种影响,我们建议使用µ-Slide Rack或µ-Dish Rack等保护底部材料。 该解决方案还允许同时方便地处理多达8个µ-Slide或6个µ-Dish。
  
  10、如何最小化µ-Plate 24 孔中的弯液面?
  
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  弯液面的形成是小型开放孔的固有特性,无法完全避免。
  
  与疏水表面相比,弯液面更容易在亲水表面上形成。由于大多数贴壁细胞类型不能很好地附着在疏水表面上,ibidi 提供具有亲水、组织培养处理表面和最佳细胞粘附特性的培养容器 ( µ-Plate 24 孔黑色 ID 14 mm ibiTreat,#82426)。然而,在这种情况下,弯液面的形成可能比使用未涂层板时更突出。
  
  为了减少弯液面的形成,请尝试使用具有未经处理的疏水表面的 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic (#82421)。当充满水时,该表面几乎不会形成弯液面。然而,细胞培养基中的蛋白质会附着在孔的表面。一段时间后,这将形成非共价单分子涂层,形成亲水表面和突出的弯月面。水和缓冲液都不能洗掉蛋白质涂层。
  
  为了尽量减少成像过程中的半月板问题并确保细胞附着,您可以在 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic 中尝试以下方案:
  
   用结合蛋白(例如聚-L-赖氨酸或纤连蛋白)包被孔以支持细胞附着。使用尽可能小的体积以确保只有孔的下部是亲水的(例如,0.5–0.8 ml)。小心处理板,使孔的上部不与蛋白质溶液接触。涂敷后,小心地除去溶液。
  
   将细胞接种到 0.5–0.8 ml 培养基中。定期检查,至少每天一次,看看这个量是否足以确保您的细胞存活。如有必要,更换培养基,不要让孔的上部“湿”。
  
   成像时,用 1.5–2 ml 无蛋白质溶液或缓冲液替换培养基。现在,第一步的亲水涂层应该低于您的填充水平,并且由于孔上部的疏水性,应该只会形成最小的弯液面。

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